CLONACIÓN MOLECULAR:

La clonación molecular es usada en varios experimentos biológicos y aplicaciones prácticas como son la toma de huellas dactilares y la producción de proteínas. Cuando se habla de la clonación molecular se habla de llegar a amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, y esta debe de estar vinculada a un origen de replicación; que en este caso es una secuencia de ADN.





El objetivo de la clonación molecular es aislar un gen o cualquier otra sustancia concreta de ADN y amplificarlo en cantidades suficientes que permitan su estudio. El proceso de la clonación molecular implica la transferencia de una secuencia de ADN de interés a una célula de un microorganismo. A continuación se cultiva el microorganismopara que se reproduzca la secuencia de ADN junto a su propio ADN. Dado que cada microorganismo individual de una colonia procede de una única célula original y contiene el mismo segmento idéntico transferido de ADN, se denomina clon; por su parte todo el proceso de generación de grandes cantidades de la secuencia de interés se llama clonación molecular.


El proceso de clonación molecular consiste en cuatro pasos:

Fragmentación: Inicialmente, el ADN de interés necesita ser fragmentado para proveer un segmento relevante de ADN de un buen tamaño.

Ligación: Un procedimiento de ligación se emplea cuando el fragmento amplificado se inserta en un vector (el vector de clonación). Dicho vector (que generalmente es circular) se convierte en una secuencia lineal utilizando enzimas de restricción, y es incubado con el fragmento de interés bajo las condiciones apropiadas con una enzima llamada ADN ligasa.

Transfección: Consiste en introducir la secuencia formada dentro de células.

Selección: Es cuando finalmente se seleccionan las células que han sidotransfectadas con éxito con el nuevo ADN